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    技術文章首頁 > 技術文章 分享!線粒體膜電位熒光探針用來檢測細菌膜電位的工作原理
    • 分享!線粒體膜電位熒光探針用來檢測細菌膜電位的工作原理
    • 點擊次數:1971 發布時間:2022-09-20
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    •   線粒體膜電位熒光探針是一種廣泛用于檢測線粒體膜電△Ψm位的理想熒光探針。其染料以電勢依賴性的方式積聚在線粒體內,可以用來檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。正常線粒體內,電位熒光探針聚集在線粒體基質中形成聚合物,聚合物發出強烈的紅色熒光(Ex=585nm,Em=590nm);不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失,本產品只能以單體的形式存在于胞漿中,產生綠色熒光(Ex=514nm,Em=529nm)。線粒體膜電位熒光探針不僅可用于定性檢測,因顏色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。也可以用于定量檢測,因線粒體的去極化程度可以通過紅/綠熒光強度的比例來衡量。觀察時,只需使用常規的觀察紅色熒光和綠色熒光的設置即可。
       
        線粒體膜電位熒光探針用于檢測細胞的線粒體膜電位時常用的濃度范圍為1~20μg/mL,對于很多細胞適宜采用的濃度為10μg/mL。
       
        線粒體膜電位熒光探針用來檢測細菌膜電位的工作原理在于:
        線粒體膜電位熒光探針在所有細菌細胞內發綠色熒光,由于更高的膜電位引起染料分子發生自聚作用,使得染料的熒光往紅色發射波長處遷移,紅色熒光強度增高,此時紅色/綠色熒光信號比高。質子離子載體比如CCCP,通過去除質子梯度來破壞線粒體膜電位,從而導致紅色熒光強度降低,此時紅色/綠色熒光信號比降低。線粒體膜電位熒光探針的最大激發和發射波長約482nm和497nm。經線粒體膜電位熒光探針標記的細胞用流式細胞儀分析(用488nm激發,分別用適合FITC(綠色)和Texas Red(紅色)的發射濾片來檢測)。
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